产品
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名称 | 货号 | 规格 |
RT ProMix For qPCR (+gDNA clearer) | E0107S | 50次 |
E0107L | 50次×2 |
【产品简介】 Prescript Ⅲ RT ProMix For qPCR (+gDNA clearer) 基于 PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase, 包含合成高质量 cDNA 所需的所有成分,适合于两步法 RTqPCR检测。gDNA clearer 可彻底去除残留的基因组DNA 污染,保证后续定量结果更加可靠;2.5× Prescript Ⅲ RT ProMix 包含 PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、优化的缓冲体系、 Oligo (dT)23VN、Random hexamers、dNTPs 和 gDNA clearer 终止成分。 PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase 是通过定点突变得到的RNase H活性缺失的全新逆转录酶,该酶的热稳定性和cDNA合成效率得到大幅提升,非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录,可以在15 min内高效合成 qPCR 所用的模板 cDNA。
【储存条件】 收到本产品后,请立即置于-20℃保存。从-20℃取出使用时, 将 冻存的gDNA clearer和2.5× Prescript Ⅲ RT ProMix 融解,然后轻轻颠倒混匀后 短暂离心至管底,置于冰上备用。
【质量控制】 所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶, RNase残留。 功能检测:以1 pg - 1 µg HeLa细胞总RNA为模板,RT-qPCR检测高丰度基因的表达水平。以5-6个数量级的模板量的对数值对 CT 值做标准曲线并计算扩增效率,R2>0.990,扩增效率在0.9到1.1之间。
说明书下载:
https://aosspic10001.websiteonline.cn/pmobce00e/doc/Rtpro.pdf
名称 | 货号 | 规格 |
RT ProMix For qPCR (+gDNA clearer) | E0107S | 50次 |
E0107L | 50次×2 |
【产品简介】 Prescript Ⅲ RT ProMix For qPCR (+gDNA clearer) 基于 PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase, 包含合成高质量 cDNA 所需的所有成分,适合于两步法 RTqPCR检测。gDNA clearer 可彻底去除残留的基因组DNA 污染,保证后续定量结果更加可靠;2.5× Prescript Ⅲ RT ProMix 包含 PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、优化的缓冲体系、 Oligo (dT)23VN、Random hexamers、dNTPs 和 gDNA clearer 终止成分。 PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase 是通过定点突变得到的RNase H活性缺失的全新逆转录酶,该酶的热稳定性和cDNA合成效率得到大幅提升,非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录,可以在15 min内高效合成 qPCR 所用的模板 cDNA。
【储存条件】 收到本产品后,请立即置于-20℃保存。从-20℃取出使用时, 将 冻存的gDNA clearer和2.5× Prescript Ⅲ RT ProMix 融解,然后轻轻颠倒混匀后 短暂离心至管底,置于冰上备用。
【质量控制】 所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶, RNase残留。 功能检测:以1 pg - 1 µg HeLa细胞总RNA为模板,RT-qPCR检测高丰度基因的表达水平。以5-6个数量级的模板量的对数值对 CT 值做标准曲线并计算扩增效率,R2>0.990,扩增效率在0.9到1.1之间。
说明书下载:
https://aosspic10001.websiteonline.cn/pmobce00e/doc/Rtpro.pdf
【注意事项】 ①防止 RNase污染。请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase-free。②20 µL逆转录反应体系建议加入不超过1 µg的Total RNA。如果目的基因表达量非常低,最多加入5 µg Total RNA,否则加入RNA量过高,可能会超出后续定量PCR的线性范围。③如果加入RNA模板体积较大(如超过2 µL),请确保RNA是溶于水中而不是TE中,因为TE中的EDTA会对逆转录反应产生抑制。④请勿将gDNA clearer 与其它RT试剂配套使用,因为产品所带的2.5× Prescript Ⅲ RT ProMix 含终止gDNA clearer反应的成分,其它试剂不含此成分,可能会影响后续的qPCR 结果。⑤cDNA 产物可直接用作qPCR反应的模板。 建议作为模板的cDNA产物的体 积不超过qPCR反应体积的 1/10。